Produk

Penggunaan nitrogen yang lebih baik dalam lembu adalah penting untuk menjamin pengeluaran lembu yang mampan.Memandangkan purin dan pirimidin (PP) membentuk bahagian nitrogen rumen yang ketara, pemahaman yang lebih baik tentang penyerapan dan metabolisme perantara PP adalah penting.Kerja ini menerangkan pembangunan dan pengesahan kaedah sensitif dan khusus untuk penentuan serentak 20 purin (adenine, guanina, guanosine, inosin, 2'-deoxyguanosine, 2'-deoxyinosine, xanthine, hypoxanthine), pirimidin (sitosin, timin, uracil, cytidine, uridine, timidin, 2'-deoxyuridine), dan produk degradasinya (asid urik, allantoin, β-alanine, asid β-ureidopropionic, asid β-aminoisobutyric) dalam plasma darah lembu tenusu.Teknik berasaskan kromatografi cecair berprestasi tinggi digandingkan dengan spektrometri jisim tandem pengionan elektrospray (LC-MS/MS) telah digabungkan dengan piawaian penentukuran dipadankan matriks individu dan sebatian rujukan berlabel isotop yang stabil.Analisis kuantitatif telah didahului oleh prosedur pra-rawatan baru yang terdiri daripada pemendakan etanol, penapisan, penyejatan dan penyusunan semula.Parameter untuk pemisahan dan pengesanan semasa analisis LC-MS/MS telah disiasat.Telah disahkan bahawa menggunakan model penentukuran log dan bukannya model penentukuran linear menghasilkan CV% yang lebih rendah dan ujian kekurangan kesesuaian menunjukkan regresi linear yang memuaskan.Kaedah ini meliputi julat kepekatan untuk setiap metabolit mengikut sampel sebenar, contohnya guanin: 0.10-5.0 μmol/L, dan allantoin: 120-500 μmol/L.CV% untuk julat kuantifikasi yang dipilih adalah di bawah 25%.Kaedah ini mempunyai kebolehulangan yang baik (CV%≤25%) dan ketepatan pertengahan (CV%≤25%) dan pemulihan yang sangat baik (91-107%).Semua metabolit menunjukkan kestabilan jangka panjang yang baik dan kestabilan yang baik dalam larian (CV%≤10%).Tahap kesan matriks mutlak yang berbeza diperhatikan dalam plasma, air kencing dan susu.Penentuan kesan matriks relatif mendedahkan bahawa kaedah itu sesuai untuk hampir semua metabolit PP yang diperiksa dalam plasma yang diambil dari arteri dan vena hepatik portal, hepatik dan gastrosplenik dan, dengan beberapa pengecualian, juga untuk spesies lain seperti ayam, babi, cerpelai, manusia dan tikus.