Produk

Beta-D-2'-deoxy-2'-fluoro-2'-C-methylcytidine (PSI-6130) ialah perencat spesifik kuat sintesis RNA virus hepatitis C (HCV) dalam sel replika Huh-7.Untuk menghalang polimerase RNA HCV NS5B, PSI-6130 mesti difosforilasi kepada bentuk 5'-trifosfat.Fosforilasi PSI-6130 dan perencatan HCV NS5B telah disiasat.Fosforilasi PSI-6130 oleh rekombinan manusia 2'-deoxycytidine kinase (dCK) dan uridine-cytidine kinase 1 (UCK-1) diukur dengan menggunakan tindak balas spektrofotometri berganding.PSI-6130 ditunjukkan sebagai substrat untuk dCK yang telah disucikan, dengan Km 81 mikroM dan kcat 0.007 s-1, tetapi bukan substrat untuk UCK-1.PSI-6130 monofosfat (PSI-6130-MP) telah difosforilasi dengan cekap kepada difosfat dan seterusnya kepada trifosfat oleh kinase UMP-CMP manusia rekombinan dan kinase nukleosida difosfat.Perencatan polimerase RNA jenis liar dan bermutasi (S282T) HCV NS5B telah dikaji.Pemalar perencatan keadaan mantap (Ki) untuk PSI-61 30 trifosfat (PSI-6130-TP) dengan enzim jenis liar ialah 4.3 mikroM.Keputusan yang sama diperoleh dengan 2'-C-methyladenosine triphosphate (Ki=1.5 microM) dan 2'-C-methylcytidine triphosphate (Ki=1.6 microM).NS5B dengan mutasi S282T, yang diketahui memberikan rintangan kepada 2'-C-methyladenosine, telah dihalang oleh PSI-6130-TP dengan cekap seperti jenis liar.Penggabungan PSI-6130-MP ke dalam RNA yang dimangkin oleh polimerase RNA NS5B yang telah dimurnikan mengakibatkan penamatan rantai.