Produk

LecA (PA-IL) ialah lektin dan adhesin sitotoksik yang dihasilkan oleh Pseudomonas aeruginosa yang mengikat galaktosida hidrofobik dengan kekhususan dan pertalian tinggi.Dengan menggunakan gabungan terjemahan lecA-egfp dan analisis imunoblot matriks ekstraselular biofilem, kami menunjukkan bahawa lecA dinyatakan dalam sel tumbuh biofilm.Dalam ujian biofilem statik pada kedua-dua polistirena dan keluli tahan karat, kedalaman biofilem dan liputan permukaan dikurangkan dengan mutasi lecA dan dipertingkatkan dalam terikan lebihan pengeluaran LecA PAO-P47.Liputan permukaan biofilem oleh strain induk, PAO-P47 tetapi bukan mutan lecA pada kupon keluli juga dihalang oleh pertumbuhan dengan kehadiran sama ada isopropyl-beta-D-thiogalactoside (IPTG) atau p-nitrophenyl-alpha-D-galactoside ( NPG).Tambahan pula, biofilm jenis liar matang yang terbentuk tanpa ketiadaan galactosides hidrofobik ini boleh disebarkan dengan penambahan IPTG.Sebaliknya, penambahan p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) yang mempunyai pertalian tinggi untuk lecti n P. aeruginosa LecB (PA-IIL) tidak mempunyai kesan ke atas pembentukan atau penyebaran biofilm.Pertumbuhan planktonik P. aeruginosa PAO1 tidak terjejas oleh kehadiran IPTG, NPG atau NPF, dan ketegangan juga tidak dapat menggunakan gula ini sebagai sumber karbon, menunjukkan bahawa kesan yang diperhatikan pada pembentukan biofilm adalah disebabkan oleh perencatan kompetitif LecA-ligan. mengikat.Keputusan yang sama juga diperoleh untuk biofilem yang ditanam di bawah keadaan aliran dinamik pada kupon keluli, menunjukkan bahawa LecA menyumbang kepada seni bina biofilem P. aeruginosa di bawah keadaan persekitaran yang berbeza.

Satu alpha-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) yang mampu membebaskan sisa t-fucosyl daripada rantai sisi oligosakarida xyloglucan telah dikesan dalam daun tumbuhan Arabidopsis.Selain itu, alfa-L-fucosidase dengan kekhususan substrat yang sama telah disucikan daripada daun kubis (Brassica oleracea) untuk menjadikan jalur tunggal pada SDS-PAGE.Dua jujukan peptida diperoleh daripada jalur protein ini, dan ia digunakan untuk mengenal pasti pengekodan gen Arabidopsis untuk alpha-fucosidase yang kami cadangkan untuk memanggil AtFXG1.Di samping itu, gen Arabidopsis dengan homologi dengan alpha-L-fucosidases yang diketahui juga telah ditemui, dan kami mencadangkan untuk menamakannya sebagai AtFUC1.Kedua-dua AtFXG1 dan ATFUC1 dinyatakan secara heterolog dalam sel Pichia pastoris dan aktiviti alpha-L-fucosidase yang dirembeskan kepada medium kultur.Alfa-L-fucosidase yang dikodkan oleh AtFXG1 adalah aktif terhadap oligosakarida daripada xyloglucan XXFG serta terhadap 2'-fucosyl-lactitol tetapi tidak terhadap p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside.Walau bagaimanapun, AtFUC1 dinyatakan secara heterolog hanya aktif terhadap 2'-fucosyl-lactitol.Oleh itu, yang pertama mesti berkaitan dengan metabolisme xyloglucan.