Produk

Pengumpulan nuklear bentuk mutan protein nuklear Lamin-A, dipanggil Progerin (PG) atau Lamin AΔ50, berlaku dalam Sindrom Progeria Hutchinson-Gilford (HGPS) atau Progeria, penyakit penuaan dipercepatkan.Salah satu gejala utama gangguan genetik ini ialah kehilangan lemak subkutaneus akibat lipodistrofi yang dramatik. Kami secara stabil mendorong ekspresi PG manusia dan GFP -Green Fluorescent Protein- sebagai kawalan dalam sel 3T3L1 menggunakan sistem lentiviral untuk mengkaji kesan ekspresi PG dalam kapasiti pembezaan garisan sel ini, salah satu model adipogenik yang paling banyak digunakan.Proteomik kuantitatif (iTRAQ) telah dilakukan untuk mengkaji kesan pengumpulan PG.Beberapa protein termodulat telah disahkan oleh immunoblotting dan PCR masa nyata.Fungsi mitokondria dianalisis dengan pengukuran a) aktiviti basal mitokondria, b) pengeluaran anion superoksida dan c) kecekapan individu bagi kompleks rantai pernafasan yang berbeza. Kami mendapati bahawa ekspresi berlebihan PG oleh penghantaran gen lentivi ral membawa kepada penurunan dalam kadar percambahan dan kepada kecacatan dalam kapasiti adipogenik jika dibandingkan dengan kawalan.Analisis proteomik kuantitatif menunjukkan 181 protein secara signifikan (p<0.05) dimodulasi dalam preadiposit mengekspresikan PG.Fungsi mitokondria terjejas dalam sel pengekspres PG.Secara khusus, kami telah mengesan peningkatan dalam aktiviti kompleks I dan pengeluaran berlebihan anion Superoxide.Inkubasi dengan agen penghapus Spesies Oksigen Reaktif (ROS) mendorong kepada penurunan proteolisis autofagik seperti yang didedahkan oleh nisbah LC3-II/LC3-I. Ekspresi PG dalam sel 3T3L1 menggalakkan perubahan dalam beberapa Proses Biologi, termasuk struktur sitoskeleton, metabolisme lipid, kalsium peraturan, terjemahan, lipatan protein dan penjanaan tenaga oleh mitokondria.Data kami menguatkan sumbangan pengumpulan ROS kepada fenotip penuaan pramatang dan mewujudkan hubungan antara disfungsi mitokondria dan kehilangan proteostasis dalam HGPS.