Produk

Sama seperti virus RNA untaian positif lain, virus tombus direplikasi oleh kompleks replika virus terikat membran (VRC).VRC terdiri daripada polimerase RNA yang bergantung kepada RNA (RdRp) berkod virus p92, pendamping RNA p33 virus, dan beberapa protein perumah yang dipilih bersama.Untuk menjadi RdRp berfungsi selepas terjemahannya, protein replikasi p92 harus dimasukkan ke dalam VRC, diikuti dengan pengaktifannya.Kami sebelum ini telah menunjukkan dalam ujian berasaskan ekstrak yis tanpa sel bahawa pengaktifan virus lagak ngeri Tomato bushy (TBSV) RdRp memerlukan faktor perumah larut.Dalam artikel ini, kami mengenal pasti protein kejutan haba selular 70 (Hsp70) sebagai faktor tuan rumah yang diikut serta yang diperlukan untuk pengaktifan TBSV RdRp rekombinan terpotong N-terminal.Di samping itu, penyekatan berasaskan molekul kecil bagi fungsi Hsp70 menghalang sintesis RNA oleh tombusvirus RdRp secara in vitro.Tambahan pula, kami menunjukkan bahawa fosfolipid neutral, iaitu, fosfatidiletanolamin (PE) dan fosfatidilkolin (PC), meningkatkan pengaktifan RdRp secara in vitro.Sebaliknya, fosfatidilgliserol (PG) menunjukkan kesan perencatan yang kuat dan dominan pada pengaktifan RdRp in vitro.Kami juga menunjukkan bahawa PE dan PC merangsang interaksi RdRp-viral plus-strand RNA [(+)RNA], manakala PG menghalang pengikatan RNA virus kepada RdRp.Berdasarkan peranan stimulasi berbanding perencatan pelbagai fosfolipid dalam pengaktifan RdRp tombusvirus, kami mencadangkan komposisi lipid membran subselular yang disasarkan mungkin digunakan oleh virus tombus untuk mengawal selia pemasangan VRC baharu semasa jangkitan. Polimerase RNA yang bergantung kepada RNA berkod virus (RdRp), yang bertanggungjawab untuk mensintesis progeni RNA virus dalam sel yang dijangkiti beberapa virus RNA untai positif, pada mulanya tidak aktif.Strategi ini berkemungkinan untuk mengelakkan sintesis RNA virus dalam sitosol yang akan membawa kepada induksi tindak balas antiviral selular yang dicetuskan RNA dengan pantas.Semasa pemasangan kompleks replika terikat membran, RdRp virus menjadi diaktifkan melalui proses yang tidak difahami sepenuhnya yang menjadikan RdRp mampu sintesis RNA.Dengan menggunakan TBSV RdRp, kami menunjukkan bahawa pendamping Hsp70 selular yang dipilih bersama dan fosfolipid neutral memudahkan pengaktifan RdRp secara in vitro.Sebaliknya, fosfatidilgliserol (PG) mempunyai kesan perencatan yang dominan pada pengaktifan RdRp in vitro dan interaksi RNA RdRp-virus, menunjukkan bahawa mikrodomain membran yang mengelilingi RdRp sangat mempengaruhi keupayaannya untuk sintesis RNA.Oleh itu, pengaktifan RdRp virus mungkin bergantung pada berbilang komponen perumah dalam sel yang dijangkiti.