Produk

Lebih 70% daripada glioma gred rendah membawa mutasi R132H heterozigot dalam pengekodan gen untuk isositrat dehidrogenase 1 (IDH1).Ini memberikan enzim dengan keupayaan baru untuk menukar α-ketoglutarat kepada 2-hydroxyglutarate, akhirnya membawa kepada tumorigenesis.Sumber utama pengeluaran 2-hidroksiglutarat ialah glutamin, yang, dalam kanser, juga merupakan sumber anaplerosis kitaran asid trikarboksilik (TCA).Sumber alternatif anaplerosis ialah fluks piruvat melalui piruvat karboksilase (PC), yang merupakan laluan biasa dalam astrosit biasa.Matlamat kajian ini adalah untuk menentukan sama ada PC berfungsi sebagai sumber anaplerosis TCA dalam sel mutan IDH1 di mana glutamin digunakan untuk pengeluaran 2-hidroksiglutarat. Astrosit manusia biasa yang diabadikan yang direka bentuk untuk menyatakan IDH1 mutan heterozigot atau IDH1 jenis liar telah disiasat.Fluks piruvat melalui PC dan melalui piruvat dehidrogenase (PDH) ditentukan dengan menggunakan spektroskopi resonans magnetik untuk menyiasat pelabelan [2-¹³C] ¹³C-lab glutamat dan glutamin yang berasal dari glukosa.Ujian aktiviti, RT-PCR dan western blotting digunakan untuk menyiasat ekspresi dan aktiviti enzim yang berkaitan.Data Cancer Genome Atlas (TCGA) dianalisis untuk menilai ekspresi enzim dalam sampel glioma manusia. Berbanding dengan sel jenis liar, sel IDH1 mutan meningkat dengan ketara fluks pecahan melalui PC.Ini dikaitkan dengan peningkatan ketara dalam aktiviti dan ekspresi PC.Pada masa yang sama, aktiviti PDH menurun dengan ketara, mungkin dimediasi oleh fosforilasi PDH perencatan yang meningkat dengan ketara oleh PDH kinase 3. Selaras dengan pemerhatian dalam sel, analisis data TCGA menunjukkan peningkatan ketara dalam ekspresi PC dalam sampel glioma manusia yang mengekspresikan IDH mutan berbanding dengan liar- jenis IDH.Penemuan kami mencadangkan bahawa perubahan dalam PC dan PDH mungkin merupakan bahagian penting dalam penyesuaian selular kepada mutasi IDH1 dan boleh berfungsi sebagai sasaran terapeutik yang berpotensi.