Produk

Pembezaan fibroblas orbital kepada adiposit matang dan pengumpulan tisu adipos seterusnya telah ditunjukkan dalam perkembangan orbitopati Graves (GO).Autophagy terlibat dalam adipogenesis, tetapi sedikit yang diketahui tentang peranan autophagy dalam permulaan dan perkembangan GO.Matlamat kajian ini adalah untuk menyiasat peranan autophagy dalam patogenesis GO. Eksplan tisu adiposa/penghubung orbit daripada pesakit dengan GO dan daripada subjek normal, serta fibroblas orbital terpencil, telah dianalisis.Adipogenesis diinduksi menggunakan medium pembezaan dengan atau tanpa hidrogen peroksida, dan autophagy dimanipulasi menggunakan bafilomycin A1 dan RNA jepit rambut pendek yang disasarkan Atg5 (shRNA).Autofagosom dikenal pasti oleh mikroskop elektron.Ekspresi gen berkaitan autophagy dan faktor transkripsi berkaitan adipogenesis dianalisis oleh tindak balas rantai transkripsi-polimerase terbalik masa nyata dan / atau analisis blot Barat.Pengumpulan titisan lipid telah diperiksa dengan pewarnaan Minyak Merah O. Vakuol autofagik lebih banyak dalam sel GO berbanding sel bukan GO (p<0.05).Ekspresi gen berkaitan autophagy jauh lebih tinggi dalam tisu dan sel GO berbanding rakan bukan GO mereka.Interleukin-1β meningkatkan protein LC3-II, p62, dan Atg7 dalam sel GO.Pengumpulan autophagosome ditunjukkan pada hari ke-4 adipogenesis dan menurun pada hari ke-10, bersama-sama dengan pembentukan titisan lipid.Ekspresi protein LC3 dan p62 meningkat dalam masa 48 jam pembezaan dan berkurangan secara beransur-ansur dari hari ke 4 hingga 10. Rawatan Bafilomycin A1 dan Atg5 knockdown oleh shRNA menghalang pengumpulan titisan lipid dan mengecilkan ekspresi penanda adipogenik. Autophagy meningkat dalam tisu dan sel GO berbanding dengan tisu dan sel bukan GO, menunjukkan bahawa autophagy memainkan peranan dalam patogenesis GO.Manipulasi autophagy mungkin menjadi sasaran terapeutik untuk GO.