Produk

Mycobacterium tuberculosis boleh bertahan selama beberapa dekad dalam perumah manusia.Laluan tindak balas yang ketat yang melibatkan polifosfat tak organik [poly(P)], yang masing-masing disintesis dan dihidrolisiskan oleh polifosfat kinase (PPK) dan exopolyphosphatase (PPX), dipercayai memainkan peranan pengawalseliaan utama dalam kegigihan bakteria.Kami menunjukkan di sini bahawa pengumpulan M. tuberkulosis poli(P) dikaitkan secara sementara dengan sekatan pertumbuhan bacillary.Kami juga mengenal pasti M. tuberculosis Rv1026 sebagai exopolyphosphatase novel dengan aktiviti hidrolitik terhadap poli(P) rantai panjang.Menggunakan sistem ekspresi yang boleh diinduksi tetracycline untuk mengetuk ekspresi Rv1026 (ppx2), kami mendapati bahawa pengumpulan M. tuberculosis poly(P) membawa kepada pertumbuhan yang perlahan dan mengurangkan kerentanan terhadap isoniazid, meningkatkan ketahanan terhadap haba dan pH asid, dan meningkatkan kemandirian intraselular. semasa jangkitan makrofaj.Dengan mikroskop elektron penghantaran, strain knockdown ppx2 menunjukkan peningkatan ketebalan dinding sel, yang dikaitkan dengan kebolehtelapan dinding sel yang berkurangan kepada ubat hidrofilik dan bukannya induksi pam efluks dadah atau pembentukan biofilm yang diubah berbanding dengan kawalan vektor kosong.Analisis transkrip dan metabolomik mendedahkan anjakan turun metabolik kejatuhan ppx2 yang dicirikan oleh pengurangan transkripsi dan terjemahan dan anjakan ke bawah paras gliserol-3-fosfat.Secara ringkasnya, poli(P) memainkan peranan penting dalam sekatan pertumbuhan M. tuberkulosis dan penurunan metabolik serta menyumbang kepada toleransi antibiotik melalui kebolehtelapan dinding sel yang diubah. Tindak balas yang ketat, melibatkan molekul pengawalseliaan polifosfat tak organik [poly(P)] dan (p )ppGpp, dipercayai menjadi pengantara kegigihan Mycobacterium tuberculosis.Dalam kajian ini, kami mengenal pasti enzim baru (Rv1026, PPX2) yang bertanggungjawab untuk menghidrolisis poli rantai panjang (P).Strain M. tuberkulosis kejuruteraan genetik yang kekurangan dalam gen ppx2 menunjukkan peningkatan tahap poli(P), yang dikaitkan dengan penangkapan pertumbuhan bakteria awal dan mengurangkan kebolehpercayaan terhadap ubat baris pertama isoniazid, serta peningkatan kemandirian bakteria semasa pendedahan kepada tekanan keadaan dan dalam makrofaj.Berbanding dengan ketegangan kawalan, mutan menunjukkan peningkatan ketebalan dinding sel dan mengurangkan kebolehtelapan ubat.Ekspresi gen global dan analisis metabolit mendedahkan pengurangan ekspresi jentera transkrip dan translasi dan peralihan dalam penggunaan sumber karbon.Secara ringkasnya, pengawalan keseimbangan poli(P) adalah penting untuk pembentukan berterusan dalam M. tuberkulosis.