Produk

Kerosakan oksidatif pada asas DNA biasanya mengakibatkan pembentukan purin teroksida, terutamanya 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) dan 7,8-dihydro-8-oxoadenine (8-oxoA), yang pertama adalah telaga- lesi mutagenik yang diketahui.Oleh kerana 8-oxoG mudah terdedah kepada pengoksidaan selanjutnya berbanding dengan bes biasa, pemasukan bes semasa sintesis DNA bertentangan dengan bentuk teroksida 8-oxoG telah disiasat secara in vitro.Templat sintetik yang mengandungi lesi 8-oxoG tunggal mula-mula dirawat dengan oksidan satu elektron yang berbeza atau di bawah keadaan oksigen singlet dan kemudian tertakluk kepada lanjutan primer yang dimangkin oleh serpihan Klenow exo- (Kf exo-), betis timus DNA polimerase alpha (pol alpha). ) atau DNA polimerase beta manusia (pol beta).Selaras dengan laporan sebelumnya, dAMP dan dCMP dimasukkan secara selektif bertentangan dengan 8-oxoG dengan ketiga-tiga polimerase DNA.Menariknya, pengoksidaan 8-oxoG didapati mendorong kemasukan lembap dan dGMP bertentangan dengan lesi oleh Kf exo- dengan perencatan sementara sambungan primer yang berlaku di tapak tapak yang diubah suai.Tambahan pula, lesi membentuk blok semasa sintesis DNA oleh pol alpha dan pol beta.Eksperimen dengan oligonukleotida templat diubah suai 8-oxoA menunjukkan bahawa kedua-dua 8-oxoA dan bentuk teroksida bagi sisipan langsung 8-oxoA dTMP oleh Kf exo-.Analisis spektrometri jisim oligonukleotida yang mengandungi 8-oxoG sebelum dan selepas pengoksidaan dengan IrCl62-adalah konsisten dengan pengoksidaan terutamanya tapak 8-oxoG, menghasilkan pembentukan gugusan guanidinohydantoin sebagai produk utama.Tiada bukti untuk pembentukan tapak abasik diperolehi.Keputusan ini menunjukkan bahawa bentuk teroksida 8-oxoG, mungkin guanidinohydantoin, boleh mengarahkan salah baca dan salah memasukkan dNTP semasa sintesis DNA.Jika proses sedemikian berlaku dalam vivo, ia akan mewakili lesi mutagenik titik yang membawa kepada transversi G-->T dan G-->C.Walau bagaimanapun, bentuk teroksida 8-oxoA yang sepadan terutamanya menunjukkan sisipan T yang betul semasa sintesis DNA dengan Kf exo-.