Produk

Cerapan mekanistik ke dalam keluarga alfa-mannosidase yang bergantung kepada Ca2+ dalam simbion usus manusia.

Bakteria kolon, yang dicontohkan oleh Bacteroides thetaiotaomicron, memainkan peranan penting dalam mengekalkan kesihatan manusia dengan memanfaatkan keluarga besar glikosida hidrolase (GHs) untuk mengeksploitasi polisakarida diet dan glycan hos sebagai nutrien.Pengembangan keluarga GH sedemikian ditunjukkan oleh 23 keluarga GH92 glycosidases yang dikodkan oleh genom B. thetaiotaomicron.Di sini kami menunjukkan bahawa ini adalah alpha-mannosidases yang bertindak melalui mekanisme anjakan tunggal untuk menggunakan hos N-glycans.Struktur tiga dimensi dua mannosidase GH92 mentakrifkan keluarga protein dua domain di mana pusat pemangkin terletak di antara muka domain, memberikan bantuan asid (glutamat) dan bes (aspartat) untuk hidrolisis dalam Ca(2+)- cara bergantung.Struktur tiga dimensi GH92 dalam kompleks dengan perencat memberikan gambaran tentang kekhususan, mekanisme dan jadual perjalanan konformasi pemangkinan.Ca(2+) memainkan peranan pemangkin utama dalam membantu memesongkan mannoside daripada konformasi kerusi keadaan tanahnya (4)C(1) ke arah keadaan peralihan.（Bibliografi: Nat.Kimia.biol.6, 125-32, (2010)

Kromatografi pertalian hadapan ovalbumin glycoasparagines pada lajur concanavalin A-sepharosa.Kajian kuantitatif tentang kekhususan pengikatan lektin.

Interaksi konkanavalin A (ConA) yang tidak bergerak Sepharose 4B dengan 10 glikoasparagin yang diperolehi daripada ovalbumin telah disiasat secara kuantitatif oleh kromatografi pertalian hadapan.Dalam kaedah ini, larutan karbohidrat digunakan secara berterusan pada lajur ConA-Sepharose dan keterlambatan hadapan elusi diukur sebagai parameter kekuatan interaksi.Pemalar disosiasi (Kd) bagi setiap sakarida dengan ConA boleh ditentukan.Analisis pengikatan p-nitrophenyl-alpha, D-mannoside telah menunjukkan bahawa sifat pengikatan ConA tidak berubah pada dasarnya selepas imobilisasi pada Sepharose 4B.Setiap ovalbumin glycoasparagines dilabelkan dengan tritium dengan kaedah metilasi reduktif untuk analisis.Perbandingan nilai Kd yang diperoleh menunjukkan bahawa pengikatan ConA berbeza dengan ketara dengan perbezaan struktur rantai glikosil yang sangat sedikit.Keputusan menunjukkan bahawa ConA mengiktiraf struktur rantai glikosil tertentu, Man alpha 1-6(Man alpha 1-3)Man, di mana sekurang-kurangnya satu kumpulan hidroksil pada kedudukan C-3 bagi mannose berkait C-6 harus bebas.